Perbezaan Antara Nitrocellulose dan PVDF | Nitrocellulose vs PVDF
Perbezaan Utama - Nitrocellulose vs PVDF
Blotting Barat adalah kaedah yang membolehkan pengesanan dan kuantifikasi protein tertentu dari sampel protein. Kebolehpercayaan teknik bergantung kepada pemilihan membran yang betul untuk penyerapan protein dari gel. Terdapat pelbagai jenis membran microporous. Membran Nitrocellulose dan PVDF adalah dua membran seperti yang diutamakan oleh para penyelidik kerana sifat-sifat khusus mereka terhadap jenis membran yang lain. Pemilihan antara nitrocellulose atau PVDF juga merupakan satu lagi cabaran di barat. Kedua-dua nitroselulosa dan PVDF mempunyai kapasiti penyerapan protein yang tinggi. Perbezaan utama antara membran nitrocellulose dan PVDF ialah membran nitrellulosa tidak mempunyai keupayaan untuk menghilangkan antibodi dan menggunakan semula membran untuk reprobing antibodi manakala membran PVDF telah melucutkan dan menggunakan semula keupayaan .
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Nitrocellulose
3. Apakah PVDF
4. Perbandingan Side by Side - Nitrocellulose vs PVDF
5. Ringkasan
Apakah Nitrocellulose?
Nitrocellulose adalah polimer yang dihasilkan oleh merawat selulosa dengan asid nitrik dan digunakan untuk membuat membran mikroporous dalam biologi molekul, terutamanya untuk teknik pemusnahan seperti selatan, utara dan barat. Saiz liang membran nitroselulosa berkisar antara 3 hingga 20 μm. Membran microporous nitrocellulose memudahkan pengesanan tindak balas imunokimia yang berlaku di permukaan membran. Oleh itu, membran nitrocellulose sering digunakan untuk immobilization protein dan pengesanan protein spesifik di blotting barat. Membran Nitrocellulosa juga boleh melumpuhkan glikoprotein dan asid nukleik.
Membran Nitrocellulosa lebih disukai dalam menguji aliran sisi kerana beberapa ciri. Membran Nitrocellulosa menyerap protein pada kepekatan yang tinggi. Pelarut yang digunakan untuk membasahi membran tidak mengurangkan penyerapan protein membran nitrocellulose. Membran Nitrocellulose boleh dengan mudah dipotong ke saiz gel yang diingini dan memindahkan protein dari gel ke membran dengan pemindahan elektrik atau kapilari. Nitrocellulose membolehkan aliran lebih cepat protein melalui membran dengan potensi mengikat yang tinggi. Nitrocellulose menunjukkan kekuatan pengendalian yang lebih baik. Satu lagi ciri khas membran nitrocellulosa ialah ia boleh dengan mudah dilekatkan dengan pelekat tahan air bukan pelarut ke pelbagai sokongan plastik.
Rajah 01: Membran Nitrocellulose untuk pembongkaran barat
Apakah PVDF?
Polyvinylidene difluoride (PVDF) adalah fluoropolymer yang dihasilkan oleh polimerisasi vinilidena difluoride dan mempunyai keupayaan imobilisasi protein yang tinggi. Oleh itu, membran microporous yang diperbuat daripada PVDF digunakan dalam teknik pembongkaran barat untuk menganalisis protein tertentu dari campuran protein. Membran PVDF juga boleh digunakan untuk analisis asid amino dan penjujukan protein. Ciri-ciri yang paling penting membran PVDF ke atas membran nitrocellulose adalah ia boleh dengan mudah melepaskan antibodi dan digunakan semula untuk probe antibodi yang seterusnya.
Membran PVDF lebih tebal daripada membran nitrocellulose; Oleh itu, lebih tahan kerosakan ketika menggunakan semula. Membran PVDF sangat hidrofobik. Oleh itu, mereka mesti direndam dalam metanol atau isopropanol sebelum digunakan.
Apakah perbezaan antara Nitrocellulose dan PVDF?
- Diff Perkara Tengah sebelum Jadual ->
Nitrocellulose vs PVDF |
|
| Nitrocellulose adalah polimer yang terdiri daripada selulosa. | PVDF adalah fluoropolymer yang dihasilkan oleh polimerisasi vinilidena difluorida. |
| Saiz Lubang Membran | |
| Saiz liang biasa adalah 0. 1, 0. 2 atau 0. 45μ | Saiz liang biasa adalah 0. 1, 0. 2 atau 0. 45μm |
| Kapasiti Mengikat Protein Nitrocellulose mempunyai kapasiti mengikat protein 80 hingga 100 μg / cm | |
| 2 . PVDF mempunyai kapasiti pengikat protein 170 hingga 200 μg / cm | 2 . Kepekaan |
| Ini mempunyai sensitiviti yang rendah berbanding dengan PVDF. | |
| Ini mempunyai sensitiviti yang tinggi. | Pengesanan Protein Rendah Dikenal |
| Oleh kerana kepekaannya rendah dalam membran nitrocellulosa, ia tidak sesuai untuk pengesanan protein yang dinyatakan rendah. | |
| Ini lebih sesuai untuk mengesan protein rendah yang dinyatakan kerana sensitiviti yang tinggi. | Latar belakang Bunyi |
| Ini mempunyai bunyi latar belakang yang lebih rendah | |
| Ini mempunyai bunyi latar belakang yang lebih tinggi. | Interaksi dengan Protein |
| Protein molekul mengikat ke membran nitroselulosa melalui interaksi hidrofobik. | |
| Protein mengikat kepada membran PVDF melalui interaksi hidrofobik dan dipole. | Alam Membran |
| Nitrocellulose rapuh dan rapuh. Walau bagaimanapun, versi nitrocellulose boleh didapati, dan ia tahan. | |
| PVDF lebih tahan lama dan mempunyai rintangan kimia yang lebih tinggi. | Keupayaan untuk Strip dan Penggunaan Semula |
| Nitrocellulose mungkin mengalami kesulitan dalam pelucutan dan reprobing tanpa kehilangan isyarat. | |
| PVDF sangat sesuai untuk aplikasi penangkapan dan penjujukan. | Kesesuaian |
| Nitrocellulose sesuai untuk mengesan protein berat molekul yang rendah. | |
| PVDF lebih sesuai untuk mengesan protein berat molekul yang lebih tinggi. | Kegunaan Lain |
| Nitrocellulose boleh digunakan untuk analisis asid nukleik dan pembotolan dot / slot. | |
| PVDF boleh digunakan untuk penjujukan protein dan sistem ujian fasa pepejal. | Kos |
| Ini lebih murah daripada membran PVDF. | |
| Ini lebih mahal daripada membran nitrocellulose. | Keperluan untuk Membasahkan Pra |
| Membran Nitrocellulosa tidak memerlukan presoaking dengan metanol | |
| Membran PVDF memerlukan presoaking dengan metanol. | Ringkasan - Nitrocellulose vs PVDF |
Membran Nitrocellulose adalah membran pertama yang digunakan secara komersil untuk menguji aliran sisi. Mereka mempunyai kapasiti tinggi untuk menyerap protein. Oleh itu, membran nitrocellulose digunakan di barat membungkus. PVDF adalah satu lagi jenis membran yang digunakan dalam pembakaran barat dan ia juga mempunyai kapasiti penyerapan protein yang tinggi. Kedua-dua jenis ini digunakan di barat untuk analisis protein. Walau bagaimanapun, membran PVDF mempunyai ciri-ciri yang lebih istimewa, menjadikannya lebih sesuai daripada membran nitrocellulosa untuk pembongkaran barat. Tetapi, membran nitrocellulose lebih sesuai untuk mengesan protein berwajaran molekul rendah, membran PVDF lebih sesuai untuk mengesan protein berwajaran molekul yang tinggi. Ini adalah perbezaan antara membran nitrocellulose dan PVDF.
Image Courtesy:
1. "Western blot transfer" Oleh Bensaccount di Wikipedia bahasa Inggeris (CC BY 3. 0) melalui Wikimedia Commons
Rujukan:
1. Luque-Garcia, Jose L., Ge Zhou, Tung-Tien Sun, dan Thomas A. Neubert. "Penggunaan Membran Nitrocellulosa untuk Pencirian Protein oleh Spektrometri Massa Penyerapan Laser / Pengionan Matriks. "Kimia analitik. U. S. Perpustakaan Perubatan Negara, 15 Julai 2006. Web. 28 Mac 2017
2. "Penanda Molekul dan Bioteknologi Tanaman. "Google Books. N. p., n. d. Web. 28 Mac 2017
3. Isnin, 8 April 2013 Tweet. "The Magic's In the Membrane: Pilih bijak untuk Best Blot Results. "Biocompare. N. p., 08 Apr. 2013. Web. 28 Mac 2017
