Perbezaan antara ELISA Langsung dan Tidak Langsung | Langsung vs ELISA Tidak Langsung
Perbezaan Utama - Direct vs ELISA tidak langsung
Immunoassay yang berkaitan enzim (ELISA), juga dikenali sebagai immunoassay enzim, adalah ujian serologi yang mengesan antibodi dalam darah . Ia digunakan sebagai alat diagnostik untuk mengetahui sama ada pesakit telah terdedah kepada jenis virus tertentu atau antigen lain (antigen) dan sama ada badan telah menghasilkan antibodi terhadap jangkitan. ELISA juga boleh mengenal pasti jangkitan masa lalu dan semasa. Oleh itu, ELISA sering digunakan sebagai ujian prescreening oleh doktor sebelum analisis penyakit mendalam. Ujian ini boleh dilakukan di makmal dengan mengambil sampel darah dari pesakit. Terdapat dua jenis ujian ELISA: ELISA langsung dan ELISA tidak langsung. Perbezaan utama antara ELISA langsung dan tidak langsung ialah ELISA tidak langsung adalah lebih sensitif dan memerlukan penambahan antibodi sekunder manakala ELISA terus kurang sensitif dan hanya menggunakan antibodi utama .
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Direct ELISA
3. Apakah ELISA Tidak Langsung
4. Perbandingan Side by Side - Langsung vs ELISA Tidak Langsung
5. Ringkasan
Apakah ELISA Langsung?
ELISA adalah ujian diagnostik penyakit yang dilakukan untuk mengenal pasti kehadiran antigen atau antibodi tertentu dalam darah. Ia dilakukan sebagai ujian plat. Ia menggunakan antibodi yang dikaitkan dengan enzim mudah diuji. Kehadiran antigen dalam sampel serum mengikat dengan antibodi tertentu yang dikaitkan dengan enzim. Dalam langkah terakhir, substrat tertentu ditambah untuk bertindak balas dengan enzim. Enzim menukar substrat menjadi produk yang berwarna atau menghasilkan isyarat. Perubahan warna dalam substrat kimia mendedahkan kehadiran antibodi tertentu dalam sampel serum. Ujian ELISA langsung hanya menggunakan antibodi utama yang dikaitkan dengan enzim. Setelah mengikat antigen, ia dengan cepat mengubah warna, menunjukkan kehadiran agen berjangkit dalam darah. Walau bagaimanapun, intensiti isyarat adalah lemah dalam ELISA secara langsung kerana epitope adalah terhad untuk mengikat antigen. Oleh itu, ELISA terus kurang sensitif berbanding ELISA tidak langsung.
Rajah 01: Ujian ELISA Langsung
Apakah ELISA Tidak Langsung?
ELISA boleh dilakukan menggunakan dua jenis antibodi iaitu; antibodi utama dan antibodi sekunder. Peralatan ELISA tidak langsung menggunakan kedua-dua jenis antibodi untuk menguatkan isyarat untuk pengesanan yang lebih baik. Teknik ELISA tidak langsung dilakukan seperti berikut.
- Plat diinkubasi dengan antigen dan dibasuh untuk menyekat pengikat tidak spesifik.
- Kemudian antibodi primer ditambah dan dibasuh.
- Antibodi sekunder yang berkaitan dengan enzim ditambah dan dibasuh.
- Satu substrat ditambah dan dibenarkan bertindak balas dengan enzim.
- Isyarat dikesan, dan kehadiran atau ketiadaan antigen spesifik dalam sampel dikenalpasti.
Dalam ujian ELISA tidak langsung, beberapa antibodi sekunder boleh mengikat kepada antibodi utama tunggal. Antibodi sekunder dikaitkan dengan enzim mudah diuji. Oleh itu, satu mengikat boleh membuat isyarat yang kuat kerana lebih daripada satu interaksi. Oleh itu, ELISA tidak langsung lebih sensitif daripada ELISA langsung. Walau bagaimanapun, ELISA tidak langsung boleh membuat isyarat tidak spesifik disebabkan oleh tindak balas balas antibodi sekunder.
Rajah 02: Ujian ELISA Tidak Langsung
Apakah perbezaan antara ELISA Langsung dan Tidak Langsung?
- Diff Artikel Tengah sebelum Jadual ->
Langsung vs ELISA Tidak Langsung |
|
| ELISA Langsung kurang sensitif berbanding dengan ELISA tidak langsung. | ELISA tidak langsung lebih sensitif. |
| Masa diambil | |
| Ujian ELISA langsung adalah proses yang cepat. | ELISA tidak langsung memakan masa. |
| Penggunaan Antibodi | |
| Hanya satu jenis antibodi (antibodi utama) yang digunakan dalam ELISA langsung. | Antibodi primer dan sekunder digunakan untuk ELISA tidak langsung. |
| Pautan dengan Enzim | |
| Antibodi utama dikaitkan dengan enzim. | Antibodi sekunder dihubungkan dengan enzim. |
| Cross-Reactivity of Antibodies Kedua | |
| ELISA langsung menghapuskan reaktiviti silang antibodi kedua. | ELISA tidak langsung terjejas dengan reaktiviti silang antibodi kedua. |
| Isyarat | |
| Isyarat adalah lemah berbanding dengan ELISA tidak langsung. | Isyarat dikuatkan dalam ELISA tidak langsung. Oleh itu, ia mudah dikesan. |
Ringkasan - Langsung vs ELISA Tidak Langsung
ELISA adalah teknik biokimia yang digunakan terutamanya dalam imunologi untuk mengesan kehadiran antibodi atau antigen dalam sampel darah pesakit. Ia boleh dilakukan melalui dua proses yang dikenali sebagai ELISA langsung atau tidak langsung. Ujian ELISA langsung hanya menggunakan antibodi utama untuk mengesan antigen manakala ELISA tidak langsung menggunakan kedua-dua antibodi utama dan sekunder. Dalam ELISA langsung, antibodi utama dilabel manakala dalam antibodi kedua ELISA tidak langsung dilabelkan. Ini adalah perbezaan antara ELISA langsung dan tidak langsung.
Rujukan
1. "Enzim imunosorben berkaitan enzim (ELISA). "Buletin Pertubuhan Kesihatan Sedunia. U. S. Perpustakaan Perubatan Negara, 1976. Web. 29 Mac 2017
2. Loon, A. M van, J. T Van Der Logt, F. W. Heessen, dan J. Van Der Veen. "Enzim imunosorben berkaitan enzim yang menggunakan antigen berlabel untuk mengesan immunoglobulin M dan A antibodi dalam toxoplasmosis: perbandingan dengan immunofluorescence tak langsung dan assun-immunosorbent yang berkaitan enzim dua-sandwich. "Jurnal Mikrobiologi Klinikal. U. S. Perpustakaan Perubatan Negara, Jun 1983. Web. 29 Mac 2017
Image Courtesy:
1. "Rajah ELISA" Oleh Cavitri - Kerja sendiri (CC BY 3.0) melalui Wikimedia Commons
2. "ELISA tidak langsung" Oleh Cawang - Kerja sendiri (CC0) melalui Wikimedia Commons
