Perbezaan Antara Elektroforesis Gel dan SDS Page | Gel Elektroforesis vs SDS Page
Perbezaan Utama - Elektroforesis Gel vs SDS Page
Elektroforesis gel adalah teknik yang memisahkan makromolekul dalam medan elektrik. Ini adalah kaedah umum dalam biologi molekular untuk memisahkan DNA, RNA dan protein daripada campuran mengikut saiz molekul mereka. SDS Page adalah sejenis elektroforesis gel yang digunakan untuk memisahkan protein daripada campuran protein berdasarkan saiznya. Elektroforesis Gel adalah istilah yang digunakan untuk merujuk kepada teknik biasa yang digunakan untuk DNA, RNA, dan pemisahan protein manakala SDS Page adalah satu jenis elektroforesis gel. Ini adalah perbezaan utama antara elektroforesis gel dan SDS Page.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Gel Elektroforesis
3. Apakah halaman SDS
4. Perbandingan Side by Side - Elektroforesis Gel vs SDS Page
5. Ringkasan
Apakah Gel Elektroforesis?
Gel elektroforesis adalah teknik umum yang digunakan dalam makmal untuk memisahkan molekul yang dikenakan seperti DNA, RNA, protein, dan sebagainya dari campurannya. Gel digunakan dalam elektroforesis gel. Ia bertindak sebagai penyaring molekul. Terdapat dua jenis gel yang digunakan dalam elektroforesis gel iaitu agarose dan polyacrylamide. Pemilihan gel dan penyediaan gel adalah faktor penting yang perlu dipertimbangkan dalam elektroforesis gel kerana saiz liang gel perlu dimatikan dengan teliti untuk pemisahan molekul yang baik melalui elektroforesis gel. Gel elektroforesis mempunyai medan elektrik yang terhubung ke dua hujung gel. Satu hujung gel menunjukkan cas positif manakala hujung yang lain dikenakan caj negatif.
DNA dan RNA adalah molekul bermuatan negatif. Sebaik sahaja ia dimuatkan ke dalam gel dari ujung negatif gel dan diterapkan ke medan elektrik, mereka berpindah melalui liang gel ke ujung gel yang positif. Kelajuan penghijrahan bergantung pada caj dan saiz molekul. Molekul-molekul yang lebih kecil mudah memindahkan melalui liang gel daripada molekul yang lebih besar. Oleh itu, molekul-molekul yang lebih kecil bergerak jarak jauh melalui gel dan molekul-molekul yang lebih besar bergerak jarak dekat. Untuk memerhatikan perjalanan molekul pada gel, jenis pewarna khas digunakan. Medan elektrik digunakan untuk tempoh masa tertentu dan berhenti untuk menghalang kehilangan molekul dan untuk mengekalkan molekul-molekul pada kedudukan mereka yang dilalui. Band yang berbeza boleh diperhatikan dalam gel.Gelang-gelang ini mewakili molekul dengan saiz yang berbeza. Oleh itu, elektroforesis gel berguna untuk membezakan molekul mengikut saiznya.
Elektroforesis gel dimasukkan ke dalam pelbagai teknik sebagai teknik persiapan dalam biologi molekular seperti PCR, RFLP, kloning, penjujukan DNA, pemutihan selatan, pemetaan genom, dan sebagainya.
Rajah 01: gel Agarose elektroforesis
Apakah singkatan SDS?
Elektroforesis gel polyacrylamide natrium dodecyl sulfate (SDS Page) adalah sejenis elektroforesis gel yang digunakan untuk memisahkan protein. Apabila elektroforesis gel digunakan untuk memisahkan protein, rawatan khas diperlukan kerana protein tidak dicaj secara negatif seperti DNA dan RNA dan tidak berhijrah ke arah akhir positif atau hujung negatif. Oleh itu, protein adalah denatured dan disalut dengan caj negatif sebelum elektroforesis gel. Ia dilakukan menggunakan detergen yang dipanggil sodium dodecyl sulfate (SDS). Elektroforesis gel yang menggunakan SDS dan gel polyacrylamide untuk medium sokongan dikenali sebagai SDS Page. Teknik ini biasanya digunakan dalam biokimia, genetik, forensik dan biologi molekul.
Semasa SDS Page, protein bercampur dengan SDS. SDS melancarkan protein ke dalam bentuk linear dan memakainya dengan caj negatif berkadar dengan jisim molekul mereka. Oleh kerana caj negatif, molekul protein berpindah ke arah akhir pengisian positif gel dan memisahkan mengikut massa molekul mereka. Dalam SDS Page, polyacrylamide digunakan sebagai sokongan pepejal untuk gel. Pemisahan sebenar protein terutamanya bergantung pada sifat-sifat gel. Oleh itu, penyediaan gel polyacrylamide perlu dilakukan dengan teliti dan betul kepekatan polyacrylamide harus digunakan. Gel polyacrylamide menunjukkan resolusi tinggi daripada gel agarose. Oleh itu, SDS Page dianggap sebagai teknik resolusi tinggi untuk pemisahan protein.
SDS Page adalah sejenis elektroforesis gel denatur. Ia mempunyai batasan utama dalam analisis protein. Oleh kerana SDS denatur protein sebelum pemisahan, ia tidak membenarkan pengesanan aktiviti enzimatik, interaksi mengikat protein, kofaktor protein, dll.
Rajah 02: Halaman SDS
Apakah perbezaan antara Elektroforesis Gel dan SDS Page?
- Perkara di bahagian tengah Tengah sebelum Jadual ->
Elektroforesis gel vs SDS Page |
|
Gel elektroforesis adalah kaedah yang dilakukan untuk memisahkan makromolekul dengan menggunakan medan elektrik. | SDS Page adalah teknik elektroforesis gel resolusi tinggi yang digunakan untuk memisahkan protein berdasarkan massa mereka. |
Run Gel | |
Ia boleh dilakukan secara mendatar atau menegak. | SDS Page sentiasa berjalan secara menegak. |
Asas untuk Pemisahan | |
Pengasingan berlaku mengikut caj dan saiz. | Pemisahan protein berlaku mengikut jisim dan caj. |
Resolusi | |
Elektroforesis gel agarose mempunyai resolusi rendah dan elektroforesis gel polyacrylamide mempunyai resolusi yang lebih tinggi | SDS Page mempunyai resolusi yang lebih baik. |
Denaturasi | |
Gel elektroforesis termasuk teknik penapisan dan bukan penentu. | SDS Laman denatur protein sebelum pemisahan. |
Ringkasan - Elektroforesis Gel vs SDS Page
Elektroforesis gel adalah teknik umum yang digunakan untuk pemisahan dan analisis DNA, RNA dan protein berdasarkan ukuran dan caj mereka. Terdapat dua jenis elektroforesis gel utama iaitu elektroforesis gel agarose dan elektroforesis gel polyacrylamide. Gel agarose digunakan terutamanya untuk pemisahan asid nukleik; apabila resolusi yang lebih tinggi diperlukan, gel polyacrylamide digunakan. SDS Page adalah sejenis elektroforesis gel yang biasa digunakan untuk memisahkan campuran kompleks protein. Ia dianggap sebagai teknik pemisahan protein resolusi tinggi. Ini adalah perbezaan antara elektroforesis gel dan SDS Page.
Rujukan:
1. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig, dan David H. Petering. "SDS-PAGE asli: Resolusi Tinggi Elektroforetik Pemisahan Protein Dengan Pengekalan Hartanah Asli Termasuk Ion Logam Berikat. www. ncbi. nlm. nih. gov. N. p., Mei 2014. Web. 7 Apr. 2017
2. Stellwagen, Nancy C. "Elektroforesis DNA dalam gel agarose, gel polyacrylamide dan penyelesaian bebas. "Elektroforesis. U. S. Perpustakaan Perubatan Negara, Jun 2009. Web. 07 Apr. 2017
Image Courtesy:
1. "Gelelektrophoreseapparatur" (CC BY-SA 3. 0) melalui Wikimedia Commons
2. "Elektroforesis Gel Agarose DNA" oleh Sekolah Sumber Asli dari Ann Arbor - Makmal DNA (CC BY 2. 0) melalui Wikimedia Commons